細(xì)胞計(jì)數(shù)是指通過對(duì)細(xì)胞數(shù)量進(jìn)行測定來評(píng)估細(xì)胞生長和細(xì)胞活性的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù)??梢詰?yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)研究以及藥物研發(fā)等領(lǐng)域。原理基于細(xì)胞在顯微鏡下的可見性。細(xì)胞本身通常是無色的,但在顯微鏡下,細(xì)胞和周圍環(huán)境產(chǎn)生對(duì)比,使其能夠被觀察到。通過調(diào)節(jié)顯微鏡的焦點(diǎn)和放大倍數(shù),使細(xì)胞可以清晰地看到,并進(jìn)行計(jì)數(shù)。
細(xì)胞計(jì)數(shù)的原理基于顯微鏡觀察和圖像分析。具體的實(shí)驗(yàn)步驟包括:
1.做細(xì)胞懸液:將待測細(xì)胞樣品溶于適當(dāng)?shù)木彌_液中,得到細(xì)胞懸液。
2.取樣:通過一定的方法(如錐形計(jì)數(shù)管)取得細(xì)胞懸液的一個(gè)小樣本。
3.顯微鏡觀察:將取得的細(xì)胞懸液樣本放在顯微鏡的載玻片上,使用適當(dāng)?shù)姆糯蟊稊?shù)進(jìn)行觀察。
4.計(jì)數(shù):在顯微鏡下,使用計(jì)數(shù)室格網(wǎng)(如Hemocytometer)或計(jì)數(shù)板,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)室格網(wǎng)上有一個(gè)或多個(gè)已知面積的室格。細(xì)胞在其中被視為一個(gè)方形或矩形網(wǎng)絡(luò)圖,并進(jìn)行計(jì)數(shù)。
5.細(xì)胞密度計(jì)算:計(jì)算出單位體積內(nèi)細(xì)胞的平均數(shù)目,從而得到細(xì)胞的密度。
細(xì)胞計(jì)數(shù)板的維護(hù)保養(yǎng)方法:
1.使用完畢后,應(yīng)迅速清洗,防止細(xì)胞殘留導(dǎo)致板子上細(xì)胞數(shù)量的偏差。
2.使用鑷子或細(xì)胞刮片清理計(jì)數(shù)室以及計(jì)數(shù)板上的污垢。
3.清除鏡片和目鏡上的污漬,以保證清晰的顯微觀察。
4.定期檢查顯微鏡的聚焦功能,確保鏡片和目鏡完好無損。
5.適時(shí)更換和其他使用的耗材,以保證準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。
6.存放時(shí)應(yīng)避免直接陽光照射和高溫環(huán)境,防止產(chǎn)生影響結(jié)果的變化。